Capturem™ His-Tagged Purification Miniprep kit

In-Fusion® Snap Assembly EcoDry™은 cloning 시약이 tube나 well-plate 내에 1회씩 분주, 동결건조된 형태로, 실온에서 보관 가능하기 때문에 liquid handler와 같은 자동화 기기에서 high-throughput cloning을 매우 편리하게 진행할 수 있다. 직접 실험을 하거나 자동화 장비를 이용할 때 모두에서 handling을 최소화 할 수 있어 이로 인한 error나 오염을 방지할 수 있다. 뿐만 아니라 Liquid type의 시약과 마찬가지로 PCR 산물의 제한효소 처리나 ligation, blunting 없이도 cloning을 single step으로 완료할 수 있다.

In-Fusion® 기술 특성 상 어떤 vector든 제한효소 자리에 상관없이, subcloning이나 별도의 조작 없이 insert를 삽입할 수 있으며, cloning 과정이 매우 간단하기에 high-throughput으로 실험이 가능하다. Cloning 과정에서는 선형화한 vector와 vector의 양 말단 15 bp를 부가한 insert를 D.W와 함께 In-Fusion® Snap Assembly EcoDry™에 첨가하게 되는데, 온라인에서 제공하는 In-Fusion® primer design tool을 이용하면, 각각의 실험에 알맞은 primer를 편리하게 디자인할 수 있다.

반응이 시작되면, 선형화 된 DNA 가닥의 3’ end로부터 염기서열을 제거하고, 두 개의 DNA 단편에서 상보서열 간의 annealing을 통해 DNA가 결합시킨다. 이 방법은 Subcloning이나 별도의 조작 없이, 하나의 fragment뿐 아니라 여러 개의 fragment를 하나의 vector에 바로 적용할 수 있어 high-throughput 실험에 cloning할 수 있을 뿐만 아니라, adapter, linker, protein tag를 삽입하거나 mutagenesis, gene synthesis 등의 application에도 활용할 수 있다.