TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase

TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase는 Thermococcus속 고세균의 DNA polymerase를 기반으로 개발한 α형 신규 PCR 효소이다. 본 제품은 효소와 buffer가 최적화되어 있어, 일반적인 PCR 시약으로는 증폭이 어려운 서열 (GC/AT rich sequence)과 길이가 긴 타겟, crude 샘플에 대한 PCR 증폭 성공률이 향상되었다. 또한 모든 구성품 (효소, buffer, dNTP Mixture 등)이 포함된 2x premix 형태로 -20℃에서 얼지 않아, 해동 과정 없이 곧바로 primer와 주형 DNA를 추가하여 간편하게 PCR을 진행할 수 있다.

Dye plus 제품 (Code RR371A/B)은 전기영동 시 편리한 loading dye (파란색과 노란색)를 포함하고 있어 PCR 반응 후 바로 gel에 loading하여 전기영동을 진행할 수 있다. 본 제품에 포함되어 있는 효소는 상온에서의 DNA Polymerase 활성 및 3'→ 5' exonuclease 활성을 억제하는 monoclonal antibody가 포함된 hot start PCR용 효소이다.

또한 교정 기능 (proof reading)을 가진 α형 중합 효소 특유의 높은 정확성도 갖추고 있으며 특이성이 높은 PCR 증폭 결과를 얻을 수 있어 cloning에도 사용할 수 있다. 본 제품을 이용해 증폭한 PCR 산물의 대부분은 blunt end이므로, T-vector에 cloning 하는 경우 PCR 산물의 3’ 말단에 dA를 부가하는 과정이 포함된 Mighty TA-cloning Reagent Set for PrimeSTAR (Code 6019)의 사용을 추천한다.

PCR 산물은 별도의 제한효소, ligase 반응없이 그대로 cloning 할 수 있는 고효율의 PCR cloning kit인 In-Fusion® Snap Assembly Master Mix (Code 638947 외)에 적용할 수도 있다.