One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG

Product Number : RR601

내용

One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (Code RR600A, 200회; 25㎕ 반응 시)

One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG (Code RR601A, 200회; 25㎕ 반응 시) 

* Life Technologies의 Real Time PCR 장치와 같이 well 간 형광 신호 보정이 필요한 장치에 사용하며, 자세한 내용은 제품매뉴얼을 참고.

• ROX Reference Dye를 사용하는 기종
  - ROX Reference Dye (50×)
  Applied Biosystems 7900HT/7300 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
  StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
  - ROX Reference Dye II (50×)
     Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
• ROX Reference Dye를 사용하지 않는 기종
  - Thermal Cycler Dice Real Time System 시리즈 (Takara)
  - LightCycler/LightCycler 480 system (Roche Diagnostics)
  - CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)

제품 특징

• One Step RT-PCR 방법으로 RNA바이러스 등의 해석을 신속 정확하게 할 수 있다.
• 본 제품은 다양한 반응억제물질에 높은 저항성을 나타내므로, 간이 핵산추출 시약을 이용하여 추출한 crude RNA 샘플에서도 Real Time RT-PCR 분석이 가능하다.
  ＊다만, 검출 불능일 경우나, 보다 정밀한 안정된 해석 결과를 필요로 하는 경우에는 순도 높은 RNA샘플을 이용한다.
  배양 세포나 조직 샘플의 고순도 total RNA의 조제 시 권장 제품
  - TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit (Code 9767A)
  - RNAiso Plus (Code 9108/9109)

보존 -20℃

반응억제물질에 대한 내성실험 예

[반응저해 물질에 대한 내성 테스트]

그림 1. 반응 억제물질에 대한 내성 시험
다섯 종류의 반응 억제물질을 반응 용액에 첨가하여 One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, Takara 기존 제품 및 타사 제품의 저해 물질에 대한 내성을 테스트하였다. One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix는 "첨가 없음"과 Ct값의 차이가 적고 각종 반응 저해물질에 대한 내성이 높은 것으로 나타났다. 

그림 2. Multiplex 분석에서의 재현성
Human HeLa Cell Total RNA 1 pg~100 ng을 주형으로 One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix를 이용해 ACTB, GAPDH, PPIA, YWHAZ 유전자의 multiplex 발현 해석을 실시하였다. 모든 타겟에서 R2>0.99를 충족시켰다. 

그림 3. Human ACTB 유전자 발현 해석에서의 재현성 확인

Human HeLa Cell Total RNA (Code 636543) 1 pg ~1 ㎍을 주형으로 One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG를 이용하여 ACTB유전자 발현 해석을 3일간 나누어 진행하였다. 그 결과, One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG은 높은 직선성 (Rsq: 1)을 가지며 안정된 증폭 효율 (Eff.  92.5%)를 나타내었다.